生物帮旗下:生物产品通--生命科学科研用户的采购平台

西安恒成生物科技有限公司

生物分离介质,色谱填料,层析介质

产品分类
联系方式
  • 西安恒成生物科技有限公司
  • 联系人: 郑鹏涛
  • 电话:029-83399678
  • 邮件:zhengpengtao@henchcn.com
  • 传真:029-83399678
站内搜索
 
您当前的位置:首页 » 新闻中心 » 蛋白质分离色谱之疏水色谱
新闻中心
蛋白质分离色谱之疏水色谱
发布时间:2015-12-29        浏览次数:443        返回列表

 蛋白质表面有些疏水基团,在裂隙内部疏水基团更多,在较大浓度的盐水体系中与疏水填料配基会有疏水作用而保留,在稀盐溶液中蛋白质被洗脱。

疏水色谱只能用于生物大分子的分离,不能用于小分子分离,常用于前几步工艺的初步分离和蛋白质复性中。疏水色谱上样量一般小于离子交换色谱而大于凝胶色谱;分辨率也是小于离子交换色谱而大于凝胶色谱。其特别之处在于上样时盐浓度可以很大,盐浓度越大,保留越大。
在以上所说疏水色谱使用的盐是指盐析性盐,如 (NH4)2SO4,Na2SO4 等。在这些盐的浓溶液中蛋白质溶解度减小,但稳定性增加。另一种盐叫盐溶性盐,如盐酸胍和硫*酸盐,在这些盐的浓溶液中蛋白质溶解度增大,但稳定性减小,甚至可逆性失活。盐溶性盐不能用于疏水色谱流动相。
用于蛋白质制备的疏水介质的基质是琼脂糖。配基主要有丁基、辛基和苯基。
 

 

名称
配基
疏水性
应用
丁基琼脂糖微球
-OC 4H 9(-NC 4H 9,-SC4H 9)
乙肝疫苗、蛋白质等分离
辛基琼脂糖微球
-OC 8H 17
蛋白质分离
苯基琼脂糖微球
-OPh
蛋白质分离

 

西安恒成生物科技有限公司是一家专业从事层析介质(色谱填料)研产销一体的公司;
有两大类产品:无配基微球和层析介质
五大层析介质都有:离子交换,排阻(凝胶过滤),亲和,疏水,反向;
三类材料:琼脂糖凝胶,葡聚糖凝胶,硅胶
离子交换包括:阳离子(SP,CM)阴离子(Q,DEAE);
凝胶过滤包括:4B,6B,CL-4B,CL-6B,4BFF,6BFF
疏水包括:苯基,丁基
亲和的有:蛋白a柱,去内毒素柱,肝素柱,明胶柱,赖氨酸柱,硼酸柱,辅酶A柱,镍柱。
亲和活化中间体有:溴化*活化4B,氨已基4B,羧已基4B,环氧活化FF,NHS活化;
反向的有C18,C8,C12
 
有标签蛋白首选亲和介质,纯化效率高,分离效果好。无标签蛋白,样品成分复杂,选离子交换和疏水介质。检测分析样品,一般选排阻介质和反向介质。
亲和介质和需分离出物质有特异性的选择性亲和力,亲和介质选择性好,分离效率高,洗脱用取代基竞争替换,过程简单。
离子交换介质适用面广,可处理复杂的混合溶液;PI大的物质一般选阳离子交换介质,PI小的物质一般选择阴离子交换介质;洗脱一般用改变PH和盐浓度的方式洗脱。
疏水介质分辨率高,一般用于处理盐析以后的样品,洗脱用去离子水或低浓度缓冲液。
排阻介质根据分子大小分离,过程简单,一般用于纯化的后续工艺及精制实验室分析,特别适用于分子量相差比较大额样品。
反向介质依据物质之间极性差异进行分离,适用广泛,特别多的用于小分子有机物质,和中草药提取精制等,也多用于实验室分析。

留言

X